4-નાઇટ્રોફેનાઇલ બીટા-ડી-ગેલેક્ટોપીરાનોસાઇડ CAS:200422-18-0

અસર: ONPG એ એક સબસ્ટ્રેટ છે જેનો ઉપયોગ ખાસ કરીને એન્ઝાઇમ β-galactosidase ની હાજરી અને પ્રવૃત્તિને શોધવા માટે થાય છે.જ્યારે β-galactosidase એન્ઝાઇમ હાજર અને સક્રિય હોય છે, ત્યારે તે ONPG ને બે ઉત્પાદનોમાં વિભાજિત કરે છે: ઓ-નાઇટ્રોફેનોલ અને ગેલેક્ટોઝ ડેરિવેટિવ.ઓ-નાઇટ્રોફેનોલની મુક્તિ પીળા રંગમાં પરિણમે છે, જેને સ્પેક્ટ્રોફોટોમીટરનો ઉપયોગ કરીને માપી શકાય છે.

એપ્લિકેશન: ONPG પાસે મોલેક્યુલર બાયોલોજી અને બાયોકેમિસ્ટ્રી સંશોધનમાં ઘણી એપ્લિકેશનો છે:

β-galactosidase પ્રવૃત્તિનું નિર્ધારણ: ONPG નો ઉપયોગ સામાન્ય રીતે β-galactosidase એન્ઝાઇમની પ્રવૃત્તિને માપવા અને માપવા માટે થાય છે.ઓ-નાઇટ્રોફેનોલની રચનાનો દર, જે એન્ઝાઇમની પ્રવૃત્તિના સીધા પ્રમાણસર છે, તેને સ્પેક્ટ્રોફોટોમેટ્રિક રીતે માપી શકાય છે.

જનીન અભિવ્યક્તિ અને નિયમન: ONPG નો ઉપયોગ ઘણીવાર જનીન અભિવ્યક્તિ અને નિયમન અભ્યાસો સંબંધિત પ્રયોગોમાં થાય છે.ચોક્કસ પ્રમોટરોના નિયંત્રણ હેઠળ જનીનોની અભિવ્યક્તિનો અભ્યાસ કરવા માટે તેનો વારંવાર ફ્યુઝન પ્રોટીન એસેસમાં ઉપયોગ થાય છે, જેમ કે સામાન્ય રીતે ઉપયોગમાં લેવાતી lacZ ફ્યુઝન સિસ્ટમ.ONPG નો ઉપયોગ કરીને માપવામાં આવતી બીટા-ગેલેક્ટોસિડેઝ પ્રવૃત્તિ જનીન અભિવ્યક્તિના સ્તરની આંતરદૃષ્ટિ પ્રદાન કરે છે.

β-galactosidase પ્રવૃત્તિ માટે સ્ક્રીનીંગ: ONPG નો ઉપયોગ β-galactosidase ને એન્કોડ કરતા LacZ જનીનની હાજરી અને કાર્યક્ષમતાને ઓળખવા માટે રિકોમ્બિનન્ટ DNA ટેકનોલોજીમાં કલરમેટ્રિક સ્ક્રીનીંગ પદ્ધતિ તરીકે કરી શકાય છે.આ સ્ક્રીનીંગ પદ્ધતિ એવા ક્લોન્સને ઓળખવામાં મદદ કરે છે જેમાં રુચિનું જનીન હોય છે.

એન્ઝાઇમ ગતિશાસ્ત્ર અભ્યાસ: ONPG β-galactosidase એન્ઝાઇમના ગતિશાસ્ત્રના અભ્યાસમાં પણ ઉપયોગી છે.વિવિધ સબસ્ટ્રેટ સાંદ્રતા પર એન્ઝાઇમ-સબસ્ટ્રેટ પ્રતિક્રિયાના દરને માપવાથી, માઇકલિસ-મેન્ટેન સ્થિરાંકો (Km) અને મહત્તમ પ્રતિક્રિયા દર (Vmax) જેવા ગતિ પરિમાણો નક્કી કરવાનું શક્ય છે.