4-નાઈટ્રોફેનાઈલ બીટા-ડી-ગેલેક્ટોપાયરાનોસાઇડ CAS:200422-18-0

અસર: ONPG એ એક સબસ્ટ્રેટ છે જેનો ઉપયોગ ખાસ કરીને β-galactosidase એન્ઝાઇમની હાજરી અને પ્રવૃત્તિ શોધવા માટે થાય છે. જ્યારે β-galactosidase એન્ઝાઇમ હાજર અને સક્રિય હોય છે, ત્યારે તે ONPG ને બે ઉત્પાદનોમાં વિભાજીત કરે છે: o-nitrophenol અને galactose ડેરિવેટિવ. o-nitrophenol ના મુક્તિના પરિણામે પીળા રંગમાં ફેરફાર થાય છે, જેને સ્પેક્ટ્રોફોટોમીટરનો ઉપયોગ કરીને માપી શકાય છે.

એપ્લિકેશન: ONPG પાસે મોલેક્યુલર બાયોલોજી અને બાયોકેમિસ્ટ્રી સંશોધનમાં ઘણા ઉપયોગો છે:

β-galactosidase પ્રવૃત્તિનું નિર્ધારણ: ONPG નો ઉપયોગ સામાન્ય રીતે β-galactosidase એન્ઝાઇમની પ્રવૃત્તિને માપવા અને તેનું પ્રમાણ નક્કી કરવા માટે થાય છે. ઓ-નાઇટ્રોફેનોલ રચનાનો દર, જે એન્ઝાઇમ પ્રવૃત્તિના સીધા પ્રમાણસર છે, તેને સ્પેક્ટ્રોફોટોમેટ્રિકલી માપી શકાય છે.

જનીન અભિવ્યક્તિ અને નિયમન: ONPG નો ઉપયોગ ઘણીવાર જનીન અભિવ્યક્તિ અને નિયમન અભ્યાસ સંબંધિત પ્રયોગોમાં થાય છે. તેનો ઉપયોગ વારંવાર ફ્યુઝન પ્રોટીન પરીક્ષણોમાં થાય છે, જેમ કે સામાન્ય રીતે ઉપયોગમાં લેવાતી lacZ ફ્યુઝન સિસ્ટમ, ચોક્કસ પ્રમોટરોના નિયંત્રણ હેઠળ જનીનોની અભિવ્યક્તિનો અભ્યાસ કરવા માટે. ONPG નો ઉપયોગ કરીને માપવામાં આવતી બીટા-ગેલેક્ટોસિડેઝ પ્રવૃત્તિ જનીન અભિવ્યક્તિના સ્તરમાં આંતરદૃષ્ટિ પ્રદાન કરે છે.

β-ગેલેક્ટોસિડેઝ પ્રવૃત્તિ માટે સ્ક્રીનીંગ: ONPG નો ઉપયોગ રિકોમ્બિનન્ટ DNA ટેકનોલોજીમાં કલરિમેટ્રિક સ્ક્રીનીંગ પદ્ધતિ તરીકે થઈ શકે છે જેથી LacZ જનીનની હાજરી અને કાર્યક્ષમતા ઓળખી શકાય, જે β-ગેલેક્ટોસિડેઝને એન્કોડ કરે છે. આ સ્ક્રીનીંગ પદ્ધતિ રસ ધરાવતા જનીન ધરાવતા ક્લોન્સને ઓળખવામાં મદદ કરે છે.

ઉત્સેચક ગતિશાસ્ત્ર અભ્યાસ: ONPG β-galactosidase ઉત્સેચકના ગતિશાસ્ત્રનો અભ્યાસ કરવામાં પણ ઉપયોગી છે. વિવિધ સબસ્ટ્રેટ સાંદ્રતા પર ઉત્સેચક-સબસ્ટ્રેટ પ્રતિક્રિયાના દરને માપીને, માઇકલિસ-મેન્ટેન સ્થિરાંકો (Km) અને મહત્તમ પ્રતિક્રિયા દર (Vmax) જેવા ગતિ પરિમાણો નક્કી કરવાનું શક્ય છે.